بررسی بیان نستین و فاکتورهای رشد عصبی در کشت سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی

Abstract

سابقه و هدف: بافت چربی منبع قابل دسترسی برای سلول های بنیادی (Adipose tissue-derived mesenchymal stem cells ADSCs) است. فاکتورهای نوروتروفیک، مولکول هایی هستند که در بقا، تکثیر و تمایز سلول های بنیادی نقش حیاتی دارند. هدف از این مطالعه بررسی ظرفیت تکثیری و قابلیت بیان فاکتورهای نوروتروفیک (NGF، CNTF، NT3، NT4، GDNF و BDNF) و همچنین بیان فیلامان بینابینی سلول های پیش ساز عصبی (نستین) در ADSCها می باشد. مواد و روش ها: ADSCها از بافت چربی زیرجلدی موش صحرایی بزرگسال به روش هضم مکانیکی و آنزیمی جدا شد. این سلول ها در محیط αMEM غنی شده با سرم 10 درصد FBS کشت شدند. سلول های پاساژ سوم به روش ایمنوسیتوشیمی برای نشان گرهای CD90 و نستین مورد ارزیابی قرار گرفتند. بیان فاکتورهای نوروتروفیک ذکر شده در ADSCها به روش RT-PCR صورت گرفت. همچنین، این سلول ها در محیط القایی به سلول های چربی و استخوان تمایز داده شدند. نتایج: ارزیابی تعیین هویت و خلوص ADSCها نشان داد که 90 درصد سلول ها برای نشان گر CD90 و 80 درصد آنها برای نشان گر نستین مثبت بوده اند. نتایج RT-PCR نیز نشان داد که فاکتورهای نوروتروفیک اشاره شده، در این سلول ها بیان شده اند. علاوه بر این، تعداد کمی از سلول ها به کرزیل ویوله واکنش دادند.نتیجه گیری: بافت چربی دارای جمعیت سلولی بنیادی است که به دلیل قابلیت تکثیر و توان تمایزی می تواند کاندید مناسبی برای پیوند سلولی در آینده باشد.