مهار بیان Rac1 توسط ملیتین با یک روش وابسته به غلظت و زمان در سلول های HeLa

Abstract

سابقه و هدف: مهاجرت سلولی نقش مهمی در بسیاری از فرآیند های بیولوژیک و پاتولوژیک از جمله رشد جنین و متاستاز ایفا می-کند. یکی از عوامل تنظیم کننده مهاجرت سلولی، پروتئین Rac1 از اعضای خانواده Rho GTPase می باشد. در این مطالعه از پپتید ملیتین موجود در سم زنبور عسل به عنوان یک ترکیب طبیعی با اثرات شناخته شده ضد سرطانی و آپوپتوزی بر بیان Rac1 استفاده گردید.مواد و روش ها: سلول های HeLa در محیط DMEM کشت داده شده و پس از رسیدن به تراکم 80 درصد به مدت 6 ساعت با غلظت های 5/0 و 1 میکروگرم بر میلی لیتر ملیتین با احتساب IC50 تیمار شدند. به محیط کشت کنترل به همان میزان آب مقطر استریل به عنوان حلال ملیتین اضافه گردید. سلول ها پس از جمع آوری لیز و سانتریفیوژ شده و میزان پروتئین به روش بردفورد تعیین غلظت گردید. میزان بیان پروتئین Rac1 در مقایسه با کنترل داخلی (β-Actin) به روش وسترن بلات و تشخیص کمی لومینسانس سنجش شد و نسبت به کنترل به صورت درصد بیان گردید. نتایج: میزان بیان پروتئین Rac1 نسبت به کنترل (100 درصد) در حضور غلظت های 5/0 و 1 میکروگرم بر میلی لیتر ملیتین به ترتیب 15/1±88/13 و 96/0±7/1 درصد به دست آمد که نشان دهنده کاهش معنی دار در بیان این پروتئین می باشد (05/0>P). نتیجه گیری: با توجه به نتایج به دست آمده می توان گفت تاثیر ملیتین بر مهار بیان Rac1 در سلول های سرطانی گردن رحم HeLa وابسته به دوز می باشد.