تولید و کریستالیزاسیون توکسین تیپ A کلستریدیوم بوتولینوم

Abstract

مقدمه: گسترش روز‌افزون کاربرد‌های پزشکی توکسین تیپ A کلستریدیوم بوتولینوم، ضرورت دست‌یابی به روش‌های تولید و حفظ فعالیت بیولوژیک آن را اجتناب ناپذیر کرده است. لذا هدف این تحقیق، تولید و ابقای فعالیت توکسین تیپ A کلستریدیوم بوتولینوم می‌باشد. روش‌کار: در این تحقیق، کشت 24 ساعته کلستریدیوم بوتولینوم تیپ A را به محیط کشت غنی شده تریپتی‌کیز سوی براث تلقیح و در خلال گرم خانه‌گذاری تولید توکسین بررسی وتعیین شد. با افزودن اسید سولفوریک به کشت 96 ساعته آن را اسیدی نموده و با سانتریفوژ رسوب حاصل جمع آوری گردید. سپس توکسین موجود در آن به صورت کریستالیزه در آورده شد. در جریان عمل، وجود توکسین با استفاده از تزریق به موش سوری تأیید گردید. یافته‌ها: کلستریدیوم بوتولینوم در شرایط ذکر شده، در این آزمایش رشد نموده و توکسین تولید نمود، به‌طوری‌که 96 ساعت گرم خانه گذاری حداکثر مقدار توکسین تولید گردید. توکسین تولید شده در محدوده pH 4 الی 8/5 به صورت کریستال های مکعب مستطیلی شکل تبدیل شد. پایداری توکسین کریستالیزه شده در طول زمان بررسی و تعیین گردید و مشخص شد که نگهداری توکسین کریستالیزه شده در یخچال 4 تا 6 درجه سانتی‌گراد، پس از 4 سال فعالیت بیولوژیک خود را حفظ کرده است. نتیجه‌گیری: توکسین تیپ A کلستریدیوم بوتولینوم در محیط آزمایشگاه به سرعت غیر فعال می‌گردد. بنابراین، حفظ فعالیت بیولوژیک آن برای مدت طولانی از اهمیت زیادی برخوردار است. چنان چه نتایج این تحقیق نشان داد، فعالیت بیولوژیک این توکسین در حالت کریستالیزه برای مدت طولانی پایدار باقی می‌ماند. بنابراین، استفاده از این امر هم برای پیشگیری از بوتولیسم و هم کاربرد‌های تحقیقاتی امکان پذیر می‌گردد . گل‌ واژگان: کلستریدیوم بوتولینوم تیپ A ، توکسین، کریستالیزاسیون، فعالیت بیولوژیک.