کشت سلولی اولیه از بافت باله دمی ماهی سفید دریای خزر (Rutilus frisii kutum)

Abstract

در این مطالعه رده‌های اولیه سلولی از طریق کشت قطعاتی از باله‌ی دمی ماهی سفید دریای خزر به روش کاشت با دو تیمار (بدون آنزیم و تیمار با آنزیم تریپسین) انجام شد. بدین منظور قطعات (1 میلی­متر مکعب) بافت باله دمی در شرایط استریل از 10 عدد ماهی جوان و سالم با میانگین وزن 1±12 گرم و میانگین طولی 1±11 سانتی متر جدا شده و در محیط کشت L-15 (Leibovitz L-15) دارای سرم جنین گاوی (10 و 20 درصد) و آنتی بیوتیک پنی سیلین استرپتومایسین با pH 8/6 و 2/7 کاشته شد و در دمای 21 و 24 درجه سانتی‌گراد نگهداری گردیدند. مخلوطی از انواع سلول‌ها از روز دوم بصورت پراکنده و متصل به فلاسک کشت مشاهده گردیدند، اما لایه‌ سلولی یکنواخت شامل سلول‌ها با مورفولوژی ناهمگن اپیتلیالی و شبه فیبروبلاستی پس از 14-12 روز تشکیل گردید. کشت مجدد سلول‌ها با استفاده از آنزیم تریپسین انجام شد. در کشت‌های مجدد، تک لایه‌ سلولی شامل سلول‌هایی با مورفولوژی همگن اپیتلیالی تشکیل شد. تاکنون این سلول‌ها 21 بار پاساژ داده شدند و این نتایج نشاندهنده امکان تولید رده سلولی دائمی از بافت باله دمی ماهی سفید دریای خزر می‌باشد.