بررسی قدرت تمایز سروتیپ‌های سالمونلا با تکنیک PCR-Ribotyping در سویه‌های جدا شده از کودکان مبتلا به اسهال زیر 15 سال

Abstract

زمینه و هدف: سالمونــلا، از مهم‌تریــن پاتوژن‌هــای ایجاد کننده اسهال و بیماری‌های ناشی از غذا در انسان می‌باشــد. از علایــم آن، اسهال، تــب، استفراغ و در برخــی مــوارد، اسهال خونــی است. به دلیل اهمیت این ارگانیسم به عنــوان یکــی از پاتوژن‌هــای بیماریــزا، شناسایــی و تشخیــص سریــع ایــن پاتــوژن و همچنین تمایز سروتیپ‌های آن از هم توسط روشهای مولکولی، لازم می‌باشد. هدف از این مطالعه، بررسی تکنیک PCR-Ribotyping (Polymerase chain reaction-Ribotyping) در سروتیپ‌های سالمونلای جدا شده از نمونه‌های اسهالی می‌باشد. روش بررسی: نمونه‌های مورد مطالعه در این تحقیق شامل سویه‌های سالمونلای جدا شده از 115 کودک مبتلا به اسهال بود که پس از تعیین نوع سروتیپ آنها، DNA با روش فنل/کلرفرم استخراج شد و تکنیک PCR-Ribotyping توسط پرایمرهای P2 و P1 مربوط به ژن 16S-23SrRNA انجام گرفت. در نهایت محصولات PCR بر روی ژل آگارز 8/1% الکتروفورز شدند و بعد از رنگ‌آمیزی ژل با اتیدیوم بروماید، آنالیز صورت گرفت. داده‌های بدست آمده با برنامه(version 11.5)SPSS و آزمون آماری Chi-square و برنامه آماری NTSYS2 آنالیز شدند. یافته‌ها: 115 نمونه سالمونلا، شامل سروتیپ‌های Paratyphi A، Paratyphi B، Paratyphi C، Paratyphi D و Typhi بودند. در ارتباط با ژن 16S-23SrRNA، تمامی سروتیپ‌ها دارای 5 باند مشابه در حد فاصل 2500-700 جفت‌باز بودند. نتیجه‌گیری: با توجه به نتایج بدست آمده، می‌توان گفت تکنیک PCR-Ribotyping دارای توانایی کافی جهت شناسایی سویه‌های سالمونلا در حد جنس می‌باشد ولی برای تعیین نوع سروتیپ، از قدرت تمایز زیادی برخوردار نمی‌باشد.