جداسازی و تمایز سلول‌های بنیادی پالپ دندان به سمت ادونتوبلاست

Abstract

سابقه و هدف: با توجه به منابع محدود سلول های بنیادی یافتن راهکارهای مناسب برای جداسازی و تکثیر و تمایز این سلول ها حائز اهمیت می باشد. یکی از منابع سهل الوصول سلول های بنیادی بالغ، پالپ دندان مولر سوم انسان می­باشد که معمولا بدون استفاده می ماند. این سلول ها قابلیت تمایز به انواع سلول ها را دارند. هدف از این پژوهش جداسازی سلول های بنیادی از پالپ دندان مولر سوم انسان با روشی نوین، کشت این سلول ها و سپس القاء تمایز سلول های کشت داده شده به سمت ادونتوبلاست بود.مواد و روشها: در این مطالعه تجربی تعداد 20 عدد دندان نهفته عقل جهت استخراج سلول­های بنیادی مورد استفاده قرار گرفت. از روش کشت قطعات بافت پالپ هضم شده برای جدا سازی سلول های بنیادی استفاده شد. بیان برخی ژن های مارکر سلول بنیادی با روش RT-PCR در این سلول ها بررسی شد. سپس این سلول­ها با استفاده از دگزامتازون و پروتئین شکل زای استخوان (BMP-2) تحت القاء برای تمایز ادونتوبلاستی قرار گرفتند و بیان ژن­های مارکر ادونتوبلاست در سلول­های تحت القاء با روش­های RT-PCR و ایمیونوسیتوشیمی بررسی شد.یافته‌ها: سلول­های بنیادی با بازدهی بالا از پالپ دندان جداسازی شدند و بررسی RT-PCR نشان داد این سلول­ها برخی مارکرهای سلول بنیادی رویانی را بیان می­کنند. سلول­های تحت القاء، مارکرهای ادونتوبلاستی مثل DSPP، DMP-1، BMP7 و Osteopontin را بیان نکردند. همچنین پروتئین های DSPP و DMP-1 در سلول­های تحت القاء تولید نشدند.

نتیجه گیری: علی رغم جداسازی موفقیت آمیز سلول های بنیادی، با روش به­کار رفته، سلول­های القاء شده به سمت ادونتوبلاست تمایز نیافتند که این امر می تواند به خاطر روش تمایز، پاساژ دادن حین القاء و یا کشت تک لایه باشد.