طراحی وکتور لنتی ویروسی بیان کننده ژن آپوپتین و تاثیر سایتوتوکسیک آن در سلول های لوسمی لنفوبلاستیک حاد Reh

Abstract

سابقه و هدف: مقاومت به داروهای شیمی درمانی یکی از مهمترین مشکلات درمانی بیماران مبتلاء به لوسمی لنفوبلاستیک حاد (Acute lymphoblastic leukemia) می­باشد. آپوپتین به دلیل توانایی القاء اختصاصی آپوپتوز در سلول­های توموری، پتانسیل انکار ناپذیری در درمان سرطان به خصوص مواردی که به شیمی درمانی پاسخ کمتری می­دهند، دارد. از این رو، در این مطالعه اثر القاء بیان آپوپتین را در القاء مرگ سلولی در لنفوبلاست­های بدخیم رده­ سلولی Reh مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش­ ها: در این مطالعه تجربی، بعد از کشت سلول­های Reh (تهیه شده از انستیتو پاستور) میزان ورود وکتور لنتی­ویروسی، فعالیت متابولیک و قدرت تکثیر سلول­ها به ترتیب با استفاده از فلوسایتومتری، MTT و تریپان­بلو در ساعت­های 24، 48، 72 و 96 بررسی شد. همچنین جهت بررسی میزان بیان ژن آپوپتین از Real time PCR استفاده شد. یافته ها: نتایج حاصل از این پژوهش نشان­دهنده­ طراحی و ساخت مناسب وکتور لنتی­ویروسی است که توانسته بیش از 65% سلول­ها را آلوده کند. همچنین پس از آلوده کردن سلول­ها با وکتور، میزان بیان ژن آپوپتین حدود 10 برابر نسبت به کنترل افزایش یافته و به دنبال آن درصد زنده­مانی سلول­ها به طور وابسته به زمان تا 53% کاهش یافت (0/01p<). همچنین نتایج، نشان دهنده تاثیر مهاری بیان ژن آپوپتین بر فعالیت متابولیک سلول­های Reh تا 35% بود (0/01p<). نتیجه گیری: نتایج مطالعه نشان داد که بیان ژن آپوپتین دارای فعالیت ضد توموری بروی سلول­های Reh بوده و می­تواند به عنوان درمانی امیدبخش در ALL استفاده گردد.