تهیه و تخلیص آنتی بادی آنتی ایمونوگلوبولین Y از خرگوش

Abstract

سابقه و هدف: آنتی بادی های زرده تخم مرغ (IgY) نقش فزاینده ای به عنوان جایگزینی آنتی بادی های پلی کونال پستانداران ایفا می کنند. این آنتی بادی ها در پیشگیری، تشخیص و درمان بیماری ها مورد استفاده قرار می گیرند. آنتی بادی های آنتی IgY در سنجش های ایمنی و درمان کاربرد دارند. هدف از این تحقیق تهیه و تخلیص آنتی ایمونوگلوبولین Y از سرم خرگوش و تایید فعالیت آن بود. مواد و روش ها: در این مطالعه IgY و سایر پروتئین های محلول در آب تخم مرغ با استفاده از با اسید و کلروفرم استخراج شدند و سپس کروماتوگرافی تیوفیلیک (T-gel) برای خالص سازی IgY استفاده گردید، سپس دو سر خرگوش ماده با ایمونوگلوبولین Y تخلیص شد، به همراه ادجوانت فروند ایمونیزه شدند، تزریق های بوستر و خونگیری در زمان های معین انجام شد. رسوب دهی توسط آمونیوم سولفات و بعد کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون یا کروماتوگرافی T-gel جهت خالص سازی آنتی IgY انجام گردید. از الکتروفورز استات سلولز و ایمونودیفوزیون دو طرفه و ELISA برای تایید ماهیت و فعالیت آنتی بادی علیه IgY استفاده شد. یافته ها: الکتروفورز محصول خالص شده (IgY) در ناحیه گاما گلوبولین مشاهده شد. آنتی بادی های خالص شده از سرم خرگوش در ناحیه گاماگلوبولین ظاهر شدند که در ایمونودیفوزیون دو طرفه علیه IgY واکنش داده و تیتر آنتی بادی در ELISA یک ده هزارم بدست آمد. نتیجه گیری: این آنتی بادی ها می توانند در سنجش های ایمنی برای شناسایی و سنجش انواع مولکول ها به عنوان معرف انتی ایمونوگلوبولین ‎Y کاربرد داشته باشند.