خالص سازی ایمونوگلوبولین های سرم انسان با روش کروماتوگرافی تیوفیلیک (T-gel)

Abstract

سابقه و هدف: آنتی بادی های انسانی که با هزینه زیاد تهیه می شود در تشخیص، پیشگیری و درمان بیماری ها کاربرد دارد. هدف از این تحقیق، طراحی و راه اندازی روشی موثر و کم هزینه برای تخلیص ایمونوگلوبولین های سرم انسان می باشد. مواد و روش ها: ایمونوگلوبولین های سرم انسان با سولفات آمونیوم (50% اشباع) رسوب داده شد و به دنبال آن خالص سازی با کروماتوگرافی تیوفیلیک انجام شد. خلوص آنتی بادی ها با روش الکتروفورز استات سلولز ارزیابی شد. غلظت آنتی بادی ها (IgG و IgM و IgA) در سرم و POOl فراکسیون های محصول با روش ایمونودیفوزیون شعاعی یک طرفه (SRID) اندازه گیری شد و درصد بازیافت محاسبه گردید. یافته ها: آنالیز محصولات در الکتروفورز استات سلولز نشانگر وجود فقط یک باند در ناحیه گاما بود. بازیافت ایمونوگلوبولین G، هفتاد و پنج درصد بود. در حالی که میزان بازیافت IgM بطور بارزی کمتر (حدود 17%) محاسبه شد. نتیجه گیری: ایمونوگلوبولین های خالص به همراه بافر با غلظت نمکی کم و PH حدود PH خنثی جدا گردید، پس نیازی به پردازش محصول نمی باشد، کروماتوگرافی تیوفیلیک موجب سهولت تخلیص ایمونوگلوبولین ها در یک مرحله بعد از رسوب دهی با سولفات آمونیوم می شود. ایمونوگلوبولین های خالص شده در این تحقیق برای روش های ایمونوشیمیایی مناسب است.