تغییرات ژنی طی تمایز سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی به سلول‌های الیگوپروژنیتور

Abstract

سابقه و هدف: کشت سلول‌های اسپرماتوگونی و تولید سلول‌های پر توان Embryonic Stem cells (ES like cells) ، این سلول‌ها را به عنوان منبع کافی و جدیدی برای سلول درمانی و ترمیم بیماریها از جمله بیماریهای نورو دژنراتیو پیشنهاد می‌دهد. هدف از تحقیق حاضر ارزیابی الگوی تغییرات ژنی طی تمایز سلول‌های اسپرماتوگونی به سلول‌های پیش ساز الیگودندروسیت می باشد. مواد و روش­ها: در این مطالعه تجربی سلول‌های اسپرماتوگونی ازبیضه موش نوزاد (6-2 روزه) هر بار 10-6 عدد موش توسط دو مرحله هضم آنزیمی جداسازی شدند. سلول های مورد مطالعه به سه گروه سلول های بنیادی شبه جنینی، نورو پروژنیتور و پیش ساز الیگودندروسیت تقسیم و مارکرهای اختصاصی stra8، mvh ،piwil2 ، C-myc,Nanog ، NF68، Nestin ، Olig2, NG2,با روش Real Time-PCR و روش ایمونوسیتوشیمی در هر مرحله تمایز بررسی شدند. یافته­ ها: بررسی‌های مولکولی نشان داد که میزان افزایش بیان ژن Nestin در سلول‌ های پیش ساز عصبی نسبت به سلول های شبه جنینی 1/3 برابر بود. در بررسی مولکولی در پایان مرحله دوم تمایز مشخص شد کشت در پایان مراحل القا منجر به افزایش معنی دار بیان ژنهای Olig2 و NG2 وکاهش بیان ژن Nestin می‌شود (0/05p<). بررسی‌های مولکولی نشان داد که این افزایش در سلول ‌های شبه الیگودندروسایت نسبت به سلول های پیش ساز عصبی به ترتیب 1/4 و1/6 برابر بود. نتیجه­ گیری: در این مطالعه نشان داده شد که سلول‌های شبه جنینی پس از پیش القا توانایی بیان مارکرهای نورونی NF68 و Nestin را دارند. سلول های بنیادین شبه جنینی ژن های NG2وOlig2 پس از مرحله القا در سلول ها بیان شد.