جدا‌سازی و شناسایی هویت مزانشیمی و ستیغ عصبی سلول‌های بنیادی مشتق از پالپ دندان

Abstract

سابقه و هدف: امروزه سلول‌های بنیادی مزانشیمی به عنوان منبع بی‌نظیر سلول‌های بنیادی بزرگسالان در نظر گرفته می‌شوند که با کم‌ترین مسائل اخلاقی در دسترس می‌باشد. این سلول‌ها جهت بررسی بیولوژی سلول‌های بنیادی، روند تمایز آن‌ها به دیگر سلول‌ها، مهندسی بافت، پزشکی ترمیمی و درمان‌های نوین سرطان مورد استفاده می‌باشد. هدف از تحقیق حاضر جدا‌سازی سلول‌های بنیادی پالپ دندان و تایید ویژگی‌های مزانشیمی آن به روش‌های معمول می‌باشد. هم‌چنین بیان پروفایل ژنی مربوط به سلول‌های ستیغ عصبی در آن‌ها بررسی می‌گردد. مواد و روش ‌ ها: پس از تهیه دندان‌ها، اتاقک پالپ نمایان و بافت پالپ به‌وسیله آنزیم کلاژناز تیپ چهار، هضم گردید. سپس، سلول‌های جدا‌شده از پالپ دندان در محیط αMEM ، حاوی 15% سرم جنین گاوی مخلوط شد و در دمای C ˚ 37، رطوبت 95% و CO2 5% کشت داده شدند. قدرت تمایز سلول‌های بنیادی پالپ در محیط‌های تمایزی استخوانی و چربی مورد ارزیابی قرار گرفت. درصد بیان نشانگرهای CD90 و CD45 به روش فلوسایتومتری بررسی شد. هم‌چنین، بیان ژن‌های p75ngfr ، slug و sox10 به روش RT-PCR مورد بررسی قرار گرفت. یافته ‌ ها: سلول‌های بنیادی مشتق از پالپ دندان قابلیت اتصال خوبی داشتند و پتانسیل تکثیری بالای از خود نشان دادند. رنگ‌آمیزی Alizarin Red و Oil red نشان داد که این سلول‌ها در شرایط مساعد، می‌توانند به ترتیب تمایز استئوژنیک و آدیپوژنیک داشته باشند. سلول‌های جداسازی شده از پالپ دندان با درصد بالا نشانگر CD90 را بیان می‌کردند؛ در حالی که درصد بیان CD45 ،که نشانگر سلول‌های هماتوپویتیک می‌باشد، در این سلول‌ها ناچیز بود. هم‌چنین، نتایج RT-PCR حاکی از بیان ژن‌هایی هم‌چون p75ngfr ، slug و sox10 در سلول‌های بنیادی مزانشیمی پالپ دندان بود. نتیجه ‌ گیری: سلول‌های جداسازی شده از پالپ دندان، ویژگی‌های سلول‌های بنیادی مزانشیمی را دارا هستند و حداقل جمعیتی از سلول‌های حاصل؛ منشا و ماهیت ستیغ عصبی دارند.