شناسایی و ردیابی ژن Tri16 در فوزاریوم‌های مولد و غیرمولد سم T-2 به‌روش PCR

Abstract

اهداف: سم 2 T- سمی‌ترین تریکوتسن است و اغلب توسط فوزاریوم اسپوروتریکیوئیدس تولید می‌شود. این مایکوتوکسین محصولات کشاورزی و به‌ویژه غلات را آلوده نموده و می‌تواند سبب بیماری‌های شدید و حتی مرگ در انسان شود. در مسیر بیوسنتز سم 2 T- ژن 16 Tri ، اسیل‌ترانسفرازی را کد می‌کند که تشکیل گروه جانبی استر را در کربن شماره 8 کاتالیز می‌کند. هدف اصلی این مطالعه، طراحی روش مولکولی براساس ژن 16 Tri به‌منظور شناسایی فوزاریوم­های مولد سم 2 T- بود. روش‌ها: در این مطالعه از نوع تجربی تعداد 111 سویه فوزاریوم (شامل 22 سویه استاندارد و 89 ایزوله فوزاریوم) مورد بررسی قرار گرفت. پس از خالص‌سازی سویه‌ها و تهیه کشت انبوه در محیط پُتیتودِکستروزبراث (PDB) ، استخراج DNA آنها با استفاده از نیتروژن مایع و با کمک بافرهای لیزکننده و محلول‌های فنل- کلروفرم- ایزوآمیل‌الکل (PCI) صورت گرفت. با استفاده از پرایمرهای طراحی‌شده و انتخابی براساس ژن 16 Tri و بهینه‌نمودن PCR این ژن در تمام سویه­های مولد و غیرمولد سم 2 T- ردیابی شد. یافته‌ها: تمام ایزوله‌های فوزاریوم مولد سم 2 T- شامل 4 ایزوله فوزاریوم اسپوروتریکوئیدس، یک گونه فوزاریوم پوئه و یک گونه فوزاریوم لانگستیه محتوی قطعه ژن 16 Tri (1380 جفت باز) بودند. نتیجه‌گیری: با پروتکل مولکولی طراحی‌شده براساس ژن 16 Tri ، می‌توان گونه‌های مهم مولد سم 2- T مانند فوزاریوم اسپوروتریکیوئیدس و فوزاریوم لانگستیه را شناسایی کرد. همچنین می‌توان گونه‌هایی از فوزاریوم که به‌طور ضعیف مولد 2- T هستند را نیز شناسایی نمود.