بیان متمایز دو واریانت مختلف Survivin در مراحل تکوینی فولیکولهای تخمدانی موش

Abstract

مقدمه و هدف: سروایوین (Survivin) یکی از جدیدترین مهارکننده­های آپوپتوزی است که بیان آن در بافت­های جنینی و توموری که سرعت تقسیم بالایی دارند مشاهده شده است. هدف از انجام این پژوهش تعیین بیان متمایز واریانت­های مختلف ژن سروایوین در مراحل مختلف تکوینی فولیکول­های تخمدانی موش بود. روش کار: مطالعه به روش تجربی بر روی موشهای ماده سوری نابالغ 12، 16 و 21 روزه نژاد NMRI انجام شد. جمع آوری فولیکول­های تخمدانی در مراحل پره آنترال، پره آنترال بزرگ و آنترال به صورت جداگانه و به روش مکانیکی انجام شد. RNA کل از هر مجموعه فولیکولی به صورت جداگانه استخراج و واکنش رونویسی معکوس با استفاده از پرایمر الیگوdt و آنزیم M-MuLV انجام شد. cDNA حاصل با استفاده از پرایمرهای اختصاصی برای سروایوین و بتا 2- میکروگلوبولین (به عنوان کنترل داخلی) طی واکنش زنجیره­ای پلیمراز تزاید یافت. در نهایت بیان نیمه کمی رونوشت سروایوین در مراحل مختلف تکوینی با استفاده از آزمون post-hoc LSD تحت آنالیز آماری قرار گرفت. نتایج: یافته­های این مطالعه نشان می­دهد که سروایوین در مراحل مختلف تکوین فولیکول­های تخمدانی بیان می­شود. واکنش RT-PCR دو محصول تزاید یافته را نشان داد که نشان دهنده بیان واریانت کوچک و بزرگتر سروایوین (40 و 140) در فولیکولهای تخمدانی است. حداکثر بیان mRNA واریانت 140 در فولیکول‌های پره آنترال مشاهده شد و با پیشرفت مرحله تکوین فولیکولی بیان آن کاهش نشان داد که این کاهش در مرحله پره­آنترال بزرگ و آنترال معنی­دار بود (0.05>P). بیان نیمه کمی واریانت 40 در سه مرحله تکوین فولیکولی تفاوت معنی­داری را نشان نداد. واریانت دیگر (سروایوین 121) در هیچکدام از مراحل تکوینی فولیکولی بیان نشد. نتیجه نهایی: کاهش بیان سروایوین در مرحله آنترال نسبت به مراحل قبلی می­تواند نشاندهنده نقش این واریانت در اترزی فولیکولی باشد. مقایسه سروایوین در مراحل مختلف تکوینی فولیکول­های تخمدانی در سطح پروتئین پیشنهاد می شود.