شناسایی جنسیت جنین انسان از طریق پلاسمای مادر باردار از هفته هشتم به بعد بوسیله Nested-PCR

Abstract

سابقه و هدف: تشخیص پیش از تولد(Prenatal Diagnosis) جنسیت جنین، نیازمند روش های تهاجمی نظیر نمونه گیری از طریق آمنیوسنتز و نمونه گیری از پرزهای کوریونی(CVS) می باشد. در سال های اخیر، یکی از روشهای غیر تهاجمی بررسی حضور DNA سلولهای هسته دار جنینی در پلاسمای خون مادر است که در این تحقیق مورد بررسی قرار گرفت. روش بررسی: در این مطالعه تجربی، سیستم Nested-PCR برای تشخیص ژن SRY جنینی با بکارگیری DNA جنینی از پلاسمای خون مادر باردار طراحی و بهینه سازی گردید. نمونه های خونی 32 زن باردار در هفته های 13-8 آبستنی جمع آوری و سپس DNA سلولها به روش فنل/کلرفرم استخراج گردید. در سیستم Nested-PCR، ژن SRY با دو جفت پرایمر طراحی شده تکثیر شد. حضور توالی های کروموزوم Y در پلاسمای خون مادر نشان دهنده جنسیت پسر جنین و در صورت فقدان آن نشان دهنده جنسیت دختر بود. یافته ها: از 32 زن باردار، پس از تکثیر ژن SRY به روش Nested-PCR، در 14مورد نتیجه مثبت بود، بطوری که در18 زن دارای جنین دختر نتایج مثبت دیده نشد و نتایج به دست آمده حساسیت 5/87 درصد را نشان داد. نتیجه گیری: روش استخراج فنل/کلرفرم یک روش ساده و موثر برای جداسازی DNA جنین از پلاسمای خون مادر می باشد و روش Nested-PCR روشی غیر تهاجمی ارزان و دردسترس برای برای تشخیص پیش از تولد می باشد .