تولید و تخلیص آنتی بادی پلی کلونال بر علیه هورمون ملاتونین

Abstract

در حال حاضر تکنیک های ایمونوشیمی نقش بسیار مهم و ارزنده ای در سنجش های کیفی و کمی ترکیبات مایعات بدن ایفا نموده و تهیه آنتی بادی علیه ایمونوژن ها، اولین گام در تهیه کیتهای ایمونوشیمی می باشد. در این مطالعه تولید و تخلیص آنتی بادی پلی کلونال علیه هورمون ملاتونین بررسی شده است. این هورمون وظایف متعدد و مهمی در حالت های فیزیولوژیک و پاتولوژیک از جمله در بیماری میگرن، سیروز و سرطان سینه و غیره دارا بوده و از مهمترین ترشحات غده پینه آل می باشد. این غده، ارگانی دور بطنی مغز بوده و طبق مطالعات هیستولوژیک و آناتومیک، ارگانی ترشحی می باشد و مواد فعال بیولوژیکی مانند ملاتونین، اکسی توسین، سروتونین و غیره را ترشح می کند. در این مطالعه هورمون ملاتونین به عنوان هاپتن در نظر گرفته شده و با اتصال آن به آلبومین سرم گاوی به صورت ایمونوژن درآمده سپس با ایمونویزاسیون سه خرگوش سفید نیوزلندی و تزریقات بوستر در فواصل منظم تیتر آنتی بادی با استفاده از منحنی های چکربورد (Checkerboard) مشخص گردید که تیتر آنتی بادی 1/2000 می باشد. با استفاده از ملاتونین متصل به آنزیم پنی سیلیناز به عنوان آنتی ژن نشان دار، تیتر آنتی ژن نشان دار 1/200 بدست آمد. در نهایت آنتی بادی با درجه خلوص بسیار زیاد بدست آمد که در سنجش های ایمونوشیمیایی مانند RIA ،ELISA ،EIA می تواند مورد استفاده قرار گیرد.