| dc.contributor.author | سرابی‌نژاد, زهره | fa_IR |
| dc.contributor.author | نوری اینانلو, داود | fa_IR |
| dc.contributor.author | تیموریان, شهرام | fa_IR |
| dc.date.accessioned | 1399-08-21T22:55:06Z | fa_IR |
| dc.date.accessioned | 2020-11-11T22:55:06Z | |
| dc.date.available | 1399-08-21T22:55:06Z | fa_IR |
| dc.date.available | 2020-11-11T22:55:06Z | |
| dc.date.issued | 2016-04-01 | en_US |
| dc.date.issued | 1395-01-13 | fa_IR |
| dc.identifier.citation | سرابی‌نژاد, زهره, نوری اینانلو, داود, تیموریان, شهرام. (1395). انتقال سازه بیانی حاوی ژن‌های کایمریک IgG1 و Fv1 به رده سلولی تخمدان هامستر در بیان اینفلیکسیماب در سیستم بطری های غلطان. مجله دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران, 74(1), 9-15. | fa_IR |
| dc.identifier.issn | 1683-1764 | |
| dc.identifier.issn | 1735-7322 | |
| dc.identifier.uri | http://tumj.tums.ac.ir/article-1-7345-fa.html | |
| dc.identifier.uri | https://iranjournals.nlai.ir/handle/123456789/489782 | |
| dc.description.abstract | زمینه و هدف: اینفلیکسیماب (Infliximab) شکلی از آنتیبادیهای نوترکیب کایمریک میباشد که هدف مناسبی برای مهار فاکتور نکروز توموری آلفا در بیماری‌های التهابی است. پژوهش کنونی با هدف ارزیابی بیان آنتی‌بادی منوکلونال اینفلیکسیماب در مقیاس نیمه‌صنعتی در سلول تخمدان هامستر چینی انجام شد.
روش بررسی: این مطالعه با هدف تولید نیمه صنعتی، از بهمن 1393 تا مرداد 1394 در مرکز رشد دانشگاه تهران انجام گردید. وکتور حاوی ژن‌های اینفلیکسیماب، به باکتری E.coli انتقال و وجود ناقل پلاسمیدی حاوی ژن برروی ژل 2% آگارز بررسی شد پلاسمید جداسازی و توسط لیپوفکتامین 2000 (Invitrogen, Germany) به سلول تخمدان هامستر چینی ترانسفکت شد. سلول‌ها توسط G-418، دو هفته تیمار و سلول‌های ترانسفکت شده انتخاب شدند. میزان تولید اینفلیکسیماب در کلونهای انتخابی پس از 48 ساعت با کیت الایزا IgG، مورد سنجش قرار گرفت. کلون با بیان بالا کشت و محصول با ستون افینیتی پروتیین A خالص شد. جهت تایید خلوص، از روش Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) و برای تعیین راندمان تخلیص، از تست الایزا استفاده شد.
یافته‌ها: بررسی ژل آگارز، وکتور حاوی ژن را تایید نمود. ارزیابی غلظت اینفلیکسیماب پس از ترانسفکشن با استفاده از تست الایزا IgG در nm 450، بیشترین و کمترین میزان بیان را به‌ترتیب ng/ml 23 و ng/ml 6 نشان داد. در مرحله تخلیص با ستون افینیتی پروتیین A، پیک مربوط به اینفلیکسیماب، در بازه زمانی 7/0 الی 8/0 دقیقه مشاهده و راندمان تخلیص، 70% محاسبه شد و وجود باندهای 25 و 50 کیلو دالتونی بر روی ژل پس از تخلیص حضور اینفلیکسیماب را تایید نمود.
نتیجه‌گیری: در پژوهش کنونی بیان اینفلیکسیماب در مقیاس نیمه‌صنعتی با استفاده از سیستم بطری غلطان با درصد بیان بالا و راندمان تخلیص حدود 70% انجام شد. | fa_IR |
| dc.language | فارسی | |
| dc.language.iso | fa_IR | |
| dc.publisher | دانشگاه علوم پزشکی تهران | fa_IR |
| dc.relation.ispartof | مجله دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران | fa_IR |
| dc.relation.ispartof | Tehran University Medical Journal | en_US |
| dc.subject | بیان ژن | fa_IR |
| dc.subject | آنتی‌بادی منوکلونال | fa_IR |
| dc.subject | اینفلیکسیماب | fa_IR |
| dc.subject | تخمدان هامستر چینی | fa_IR |
| dc.title | انتقال سازه بیانی حاوی ژن‌های کایمریک IgG1 و Fv1 به رده سلولی تخمدان هامستر در بیان اینفلیکسیماب در سیستم بطری های غلطان | fa_IR |
| dc.type | Text | en_US |
| dc.type | مقاله اصیل | fa_IR |
| dc.contributor.department | گروه بیوتکنولوژی میکروبی، دانشکده فنی و مهندسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد دامغان، دامغان، ایران. | fa_IR |
| dc.contributor.department | گروه ژنتیک مولکولی، مجتمع تولیدی- تحقیقاتی انستیتو پاستور ایران، بخش تحقیق و توسعه، تهران، ایران. | fa_IR |
| dc.contributor.department | گروه ژنتیک پزشکی و زیست‌شناسی مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران. | fa_IR |
| dc.citation.volume | 74 | |
| dc.citation.issue | 1 | |
| dc.citation.spage | 9 | |
| dc.citation.epage | 15 | |
