تهیه نانوساختار پلی اتیلن ایمینی حاوی پروتئین کایمر سه ظرفیتی بروسلا به عنوان کاندیدای واکسن

Abstract

زمینه و هدف: در باکتری‌های جنس Brucella، آنتی‌ژن‌های متنوعی شامل پروتئین‌ها و پلی‌ساکاریدها در غشای خارجی، سیتوپلاسم و فضای پری‌پلاسم شناسایی شده‌اند. برخی از این آنتی‌ژن‌ها، از جمله Omp31، TF و Bp26، توانایی تحریک پاسخ ایمنی میزبان را دارا هستند. هدف از پژوهش حاضر، طراحی و ساخت نانوساختار مبتنی بر پلی‌اتیلن ایمین حاوی پروتئین کایمر سه‌گانه به‌عنوان کاندیدای واکسن علیه بروسلا بود. روش‌ها: پس از طراحی سازه ایمونوژن با بهره‌گیری از ابزارهای بیوانفورماتیکی، ژن هدف در Escherichia coli BL21 (DE3) کلون و بیان شد. پروتئین نوترکیب با استفاده از ستون Ni-NTA خالص‌سازی گردید. سپس آنتی‌ژن استخراج‌شده در نانوساختار پلی‌اتیلن ایمین بارگذاری شد و ویژگی‌هایی نظیر اندازه ذرات، پتانسیل زتا، راندمان محبوس‌سازی و الگوی رهایش آنتی‌ژن مورد بررسی قرار گرفت. یافته‌ها: نتایج مشخصه‌یابی نشان داد که نانوسامانه پلی‌اتیلن ایمین حاوی ایمونوژن کیمرای سه‌گانه با موفقیت تولید شده است. میانگین اندازه ذرات حدود 100 نانومتر و پتانسیل زتا در حدود 45- میلی‌ولت اندازه‌گیری شد. بررسی الگوی رهایش نشان داد که طی 96 ساعت، حدود 84٪ از پروتئین محبوس‌شده آزاد گردید. نتیجه‌گیری: پروتئین نوترکیب کایمری طراحی‌شده، در کنار نانوحامل پلی‌اتیلن ایمین، پتانسیل بالایی به‌عنوان کاندیدای واکسن ساب‌یونیت علیه گونه‌های مختلف بروسلا دارد.