توسعه و معتبرسازی روش HPLC-UV برای آنالیز سولفاسالازین در پلاسما انسانی

Abstract

سابقه و هدف: در این مطالعه، یک روش سریع، ساده و پیشرفته بر اساس کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا فاز معکوس (RP-HPLC) برای آنالیز کمی سولفاسالازین در پلاسمای انسان توسعه داده شد.

روش بررسی: سولفاسالازین با استفاده از روش ساده رسوب دهی پروتئین، بوسیله استونیتریل، از پلاسما استخراج گردید. شرایط کروماتوگرافی شامل ترکیب فاز متحرک، سرعت آن، حجم تزریق و دمای آون بهینه شد. سپس روش توسعه‌یافته بر اساس خطی بودن، انتخابی بودن، صحت، دقت، حد تشخیص و حد اندازه‌گیری معتبرسازی شد.

یافته­ها: جهت بررسی سولفاسالازین از ستون C18 Brisa LC2 (250 mm × 4/6 mm, 5μ) استفاده شد. شستشو در حالت ایزوکراتیک با فاز متحرکی متشکل از مخلوط استونیتریل: آمونیوم استات 10 میلی مولار با pH معادل 6/4 (70:30) و سرعت جریان 1.0 میلی لیتر در دقیقه و دمای اتاق انجام شد. شناسایی سولفاسالازین با شناساگر UV در طول موج 361 نانومتر انجام شد. نمودار کالیبراسیون سولفاسالازین در پلاسمای انسانی در محدوده 50-125/3 میکروگرم در میلی لیتر با ضریب همبستگی 9999/0r2> خطی بود. حد تشخیص و اندازه گیری روش به ترتیب 5/0 و 5/2میکروگرم در میلی لیتر محاسبه شد.

نتیجه­ گیری: می­توان گفت که روش HPLC-UV توسعه‌یافته و تاییدشده برای تعیین دقیق سطح پلاسمایی سولفاسالازین در مطالعات فارماکوکینتیک فرمولاسیون‌های جدید مناسب است.