تأثیر لیزات پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس (+NIS) بر بیان ژن‌های bax و bcl-2 ضد آپوپتوز رده سلولی سرطان کلیه

Abstract

پیش‌زمینه و هدف: امروزه باکتری‌های لاکتوکوکوس لاکتیس به‌عنوان یک پروبیوتیک در درمان و پیشگیری سرطان نقش کلیدی ایفا می‌کنند. علاوه بر این، سویه‌های لاکتوکوکوس لاکتیس تولیدکننده باکتریوسین‌ها قادر به مهار رشد طیف وسیعی از باکتری‌ها، به‌خصوص سویه‌های مقاوم به آنتی‌بیوتیک، است. هدف از مطالعه حاضر بررسی اثرات لیزات پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس (+ NIS) بر بیان ژن‌های ضد آپوپتوز رده سلولی سرطان کلیه است. مواد و روش کار: پس از جداسازی و بررسی 60 سویه پروتئوس میرابیلیس توسط تست‌های تشخیصی و بیوشیمیایی، واکنش Multiplex PCR جهت شناسایی ژن‌های ضد آپوپتوز رده سلولی سرطان کلیه انجام شد. پس از کشت و تهیه سوپرناتانت تولیدکننده نایسین، لاکتوکوکوس لاکتی (PTCC1336)، فعالیت آن توسط چاهک گذاری در آگار بررسی گردید. توسط واکنش Real-Time PCR، بیان ژن AcrB در سویه‌های پروتئوس میرابیلیس تیمار شده با سوپرناتانت موردبررسی قرار گرفت. یافته‌ها: پس از بررسی‌های سمیت سلولی این سوپرناتانت، بیان نسبی ژن‌های bcl-2 و bax در سلول‌های سرطانی کلیه موردمطالعه قرار گرفت. نایسین تهیه‌شده بر روی سویه‌های پروتئوس میرابیلیس به دلیل تحرک و فاکتورهای حدت آن، اثر مهاری اندکی داشت. تجزیه‌وتحلیل سنجش MTT نشان داد که میزان بقای سلولی در سلول‌های سرطانی تیمار شده، با گذر زمان و افزایش غلظت سوپرناتانت بدون سلول لاکتوکوکوس لاکتیس به‌طور قابل‌توجهی کاهش یافته است. از میان 60 نمونه پروتئوس میرابیلیس، 37 نمونه واجد ژن AcrA، 59 نمونه واجد ژن AcrB و 58 نمونه دارای ژن Urea بودند. با توجه به آنالیز داده‌های تست MTT، مقدار غلظت مهارکننده نیمی حداکثر (IC50) برای این سوپرناتانت پس از گذر 72 ساعت μg/ml 8/202 محاسبه شد. بحث و نتیجه‌گیری: نتایج نشان از کاهش 86/52 درصدی بیان ژن bcl-2 و افزایش 21/60 درصدی بیان ژن bax در سلول‌های سرطانی تیمار شده نسبت به گروه کنترل است. بررسی‌های سمیت سلولی در این تحقیق که با IC50 معادل 8/202 میکروگرم/میلی‌لیتر قادر به سرکوب تکثیر سلول‌های سرطانی کلیه (ACHN) بود. هدف مطالعه بررسی اثرات لیزات پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس (+NIS) بر ژن‌های مرتبط با آپوپتوز در سلول‌های سرطان کلیه بود که این لیزات توانستند بیان ژن bcl-2 را کاهش داده و ژن bax را افزایش دهد، و نشان‌دهنده القای آپوپتوز در سلول‌های سرطانی است.