| dc.contributor.author | هریسچی, علیرضا | fa_IR |
| dc.contributor.author | قبه, مریم | fa_IR |
| dc.contributor.author | سلیمانی, جعفر | fa_IR |
| dc.date.accessioned | 1403-12-20T20:32:20Z | fa_IR |
| dc.date.accessioned | 2025-03-10T20:32:20Z | |
| dc.date.available | 1403-12-20T20:32:20Z | fa_IR |
| dc.date.available | 2025-03-10T20:32:20Z | |
| dc.date.issued | 2024-07-01 | en_US |
| dc.date.issued | 1403-04-11 | fa_IR |
| dc.identifier.citation | هریسچی, علیرضا, قبه, مریم, سلیمانی, جعفر. (1403). مقایسه اثر چند بافر لیزکننده گلبول قرمز بر استخراج DNA ژنومی از نمونههای خون منجمد در سنجش طول تلومر به روش qPCR. مجله مطالعات علوم پزشکی, 35(4), 274-286. doi: 10.61186/umj.35.4.274 | fa_IR |
| dc.identifier.issn | 2717-008X | |
| dc.identifier.uri | https://dx.doi.org/10.61186/umj.35.4.274 | |
| dc.identifier.uri | http://umj.umsu.ac.ir/article-1-6250-fa.html | |
| dc.identifier.uri | https://iranjournals.nlai.ir/handle/123456789/1120292 | |
| dc.description.abstract | پیش‌زمینه و هدف: مطالعه طول تلومر برای درک فرآیند پیری و پیشگیری از بیماری‌ها بسیار مهم است. بهینه‌سازی استخراج DNA از نمونههای خون منجمد برای حفظ طول تلومر اهمیت دارد. هدف از این مطالعه مقایسه اثر چند بافر لیزکننده گلبول قرمز بر استخراج DNA ژنومی از نمونه¬های خون منجمد در سنجش طول تلومر به روش qPCR بود.
مواد و روش کار: در این مطالعه تجربی، برای استخراج DNA از شش بافر مختلف لیز گلبول قرمز به همراه بافر استخراج CTAB استفاده شد. مقدار DNA استخراجی و خلوص آن با استفاده از اندازه‌گیری جذب و نسبتهای ۲۸۰/۲۶۰A و ۲۳۰/۲۶۰A ارزیابی شد. یکپارچگی DNA توسط الکتروفورز ژل آگارز بررسی شد. تکرارپذیری عملکرد بافرها با استفاده از درصد ضریب (%CV) تغییرات برای کمیت DNA ارزیابی شد. همچنین، کارایی PCR با بررسی آستانه چرخه (Ct) در qPCR برای هر نمونه با استفاده از معادله رگرسیون خطی و ضریب تعیین (R2) در نرمافزار GraphPad Prism v10 گزارش شد. تفاوت‌ها در سطح ۰۵/۰>p معنی‌دار در نظر گرفته شد.
یافته‌ها: بافر لیز با ترکیب 10 میلیمولار Tris-HCl 6/7 pH و 10 میلیمولار KCl، منجر به استخراج بیشترین مقدار DNA (ng/µL 01/361) شد. نتایج ژل هیچگونه خردشدگی DNA در نمونهها را نشان نداد. نسبتهای جذبی در مقایسه بین بافرها تفاوت چندانی را نشان ندادند. همچنین DNA استخراجی با بافر لیز با ترکیب 155 میلیمولار NH4Cl، 10 میلیمولار KHCO3، 5 میلیمولار EDTA در مقایسه DNA استخراجی با سایر بافرها درصد ضریب تغییرات برای کمیت DNA (%7/6CV=) و میزان کارایی PCR بهتری (%103Efficiency=، %7/99R2=) در 36B4 و (%99Efficiency=، %6/99R2=) برای تلومر داشت.
بحث و نتیجه‌گیری: بافر لیز با ترکیب 155 میلیمولار NH4Cl، 10 میلیمولار KHCO3 و 5 میلیمولار EDTA، موثرترین عملکرد را در استخراج DNA از نمونههای خون منجمد جهت مطالعه تلومر داشت. این بافر با عملکرد بهینه خود، پس از تأیید نهایی توسط مطالعات بیشتر میتواند در کارآزمایی‌ها استفاده شود.
| fa_IR |
| dc.language | فارسی | |
| dc.language.iso | fa_IR | |
| dc.publisher | دانشگاه علوم پزشکی ارومیه | fa_IR |
| dc.relation.ispartof | مجله مطالعات علوم پزشکی | fa_IR |
| dc.relation.ispartof | Studies in Medical Sciences | en_US |
| dc.relation.isversionof | https://dx.doi.org/10.61186/umj.35.4.274 | |
| dc.subject | استخراج DNA | fa_IR |
| dc.subject | خون منجمد | fa_IR |
| dc.subject | کارایی PCR | fa_IR |
| dc.subject | بافر لیزکننده گلبول قرمز | fa_IR |
| dc.subject | طول تلومر | fa_IR |
| dc.subject | بیوشیمی | fa_IR |
| dc.title | مقایسه اثر چند بافر لیزکننده گلبول قرمز بر استخراج DNA ژنومی از نمونههای خون منجمد در سنجش طول تلومر به روش qPCR | fa_IR |
| dc.type | Text | en_US |
| dc.type | پژوهشي(توصیفی- تحلیلی) | fa_IR |
| dc.contributor.department | دانشجوی کارشناسی ارشد بیوشیمی، گروه علوم شناختی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران | fa_IR |
| dc.contributor.department | استادیار بیوشیمی، گروه علوم شناختی، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران | fa_IR |
| dc.contributor.department | استادیار علوم دارویی، مرکز تحقیقات آنالیز دارویی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تبریز، ایران (نویسنده مسئول) | fa_IR |
| dc.citation.volume | 35 | |
| dc.citation.issue | 4 | |
| dc.citation.spage | 274 | |
| dc.citation.epage | 286 | |
