همسانه‌سازی و بیان ناحیه اتصالی نوروتوکسین نوع B باکتری کلستریدیوم بوتولینوم در باکتری E. coli

Abstract

p class=Chekide style=TEXT-JUSTIFY: kashida TEXT-ALIGN: justify TEXT-KASHIDA: 0% MARGIN: 0in 0in 0pt unicode-bidi: embed DIRECTION: rtl dir=rtlbspan lang=AR-SA style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5ptپیش‌زمینه و هدف:/span/bspan lang=AR-SA style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5pt سندرم بوتولیسم توسط نوروتوکسین‌های باکتری کلستریدیوم بوتولینوم ایجاد می‌شود. این نوروتوکسین‌ها دارای هفت سروتیپ از /spanfont size=2font face=Times New Romanspan dir=ltrA – G/spanspan dir=rtl/span/font/fontspan style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5ptspan dir=rtl/span span lang=AR-SAfont face=Nazanin size=2می‌باشند. بهترین راه برای جلوگیری از سندرم بوتولیسم ایجاد شده توسط /font/span/spanfont size=2font face=Times New Romanspan dir=ltrBONT/B/spanspan dir=rtl/span/font/fontspan style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5ptspan dir=rtl/span span lang=AR-SAfont face=Nazanin size=2استفاده از واکسن‌های نوترکیب ساخته‌شده‌ی ناحیه اتصالی آن می‌باشد. چون دارای اپی توپ‌های کافی برای تحریک سیستم ایمنی می‌باشد./font/span/span/pp class=Chekide style=TEXT-JUSTIFY: kashida TEXT-ALIGN: justify TEXT-KASHIDA: 0% MARGIN: 0in 0in 0pt unicode-bidi: embed DIRECTION: rtl dir=rtlspan lang=AR-SA style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5ptمواد و روش‌ها: ابتدا سکانس ژن ناحیه اتصالی را از سایت /spanfont size=2font face=Times New Romanspan dir=ltrNCBI/spanspan dir=rtl/span/font/fontspan lang=AR-SA style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5ptspan dir=rtl/span گرفته شد. سپس پرایمرهای مناسب برای آن طراحی شد. سپس باکتری کشت داده شد و ژنوم آن استخراج شد. از /spanfont size=2font face=Times New Romanspan dir=ltrPCR/spanspan dir=rtl/span/font/fontspan lang=AR-SA style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5ptspan dir=rtl/span برای تکثیر ژن استفاده گردید. ژن در وکتور /spanfont size=2font face=Times New Romanspan dir=ltrpGEM-Teasy/spanspan dir=rtl/span/font/fontspan lang=AR-SA style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5ptspan dir=rtl/span وارد شد. بعدوکتور نوترکیب وارد باکتری /spanfont size=2font face=Times New Romanspan dir=ltrE. coliDH5α/spanspan dir=rtl/span/font/fontspan lang=AR-SA style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5ptspan dir=rtl/span گردید. سپس، زیرهمسانه‌سازی در باکتری /spanfont size=2font face=Times New Romanspan dir=ltrE. coliBL21/spanspan dir=rtl/span/font/fontspan lang=AR-SA style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5ptspan dir=rtl/span با استفاده از وکتور بیانی /spanfont size=2font face=Times New Romanspan dir=ltrpET28a/spanspan dir=rtl/span/font/fontspan lang=AR-SA style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5ptspan dir=rtl/span(+) انجام شد./span/pp class=Chekide style=TEXT-JUSTIFY: kashida TEXT-ALIGN: justify TEXT-KASHIDA: 0% MARGIN: 0in 0in 0pt unicode-bidi: embed DIRECTION: rtl dir=rtlspan lang=AR-SA style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5ptنتایج: واکنش‌های /spanfont size=2font face=Times New Romanspan dir=ltrPCR/spanspan dir=rtl/span/font/fontspan lang=AR-SA style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5ptspan dir=rtl/span، تعیین توالی و نتایج حاصل از آن توسط /spanfont size=2font face=Times New Romanspan dir=ltrIPTG/spanspan dir=rtl/span/font/fontspan style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5ptspan dir=rtl/span span lang=AR-SAfont face=Nazanin size=2و بررسی بر روی /font/span/spanfont size=2font face=Times New Romanspan dir=ltrSDS – PAGE/spanspan dir=rtl/span/font/fontspan style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5ptspan dir=rtl/span span lang=AR-SAfont face=Nazanin size=2و تائید به روش وسترن نشان‌دهنده صحت کلونینگ و بیان بود./font/span/span/pp class=Chekide style=TEXT-JUSTIFY: kashida TEXT-ALIGN: justify TEXT-KASHIDA: 0% MARGIN: 0in 0in 0pt unicode-bidi: embed DIRECTION: rtl dir=rtlspan lang=AR-SA style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5ptنتیجه‌گیری: کلون و بیان این کاندید واکسن با موفقیت انجام شد و پتانسیل ایمنی‌زایی باید بررسی شود./span/pp class=Chekide style=TEXT-JUSTIFY: kashida TEXT-ALIGN: justify TEXT-KASHIDA: 0% MARGIN: 0in 0in 0pt unicode-bidi: embed DIRECTION: rtl dir=rtlspan lang=AR-SA style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5pt/span/pp class=Chekide style=TEXT-JUSTIFY: kashida TEXT-ALIGN: justify TEXT-KASHIDA: 0% MARGIN: 0in 0in 0pt unicode-bidi: embed DIRECTION: rtl dir=rtlspan lang=FA style=FONT-FAMILY: Nazanin FONT-SIZE: 9.5pt mso-ansi-font-size: 8.5pt mso-bidi-language: FAp /p/span/p