تهیه نانوساختار نیوزومی حاوی ایمنوژن سه‌ظرفیتی بروسلا به‌عنوان کاندیدای واکسن

Abstract

سابقه و هدف: بروسلوزیس جزو شایع‌ترین بیماری‌های مشترک بین انسان و دام است. از این‌رو، پیشگیری و تولید واکسن کارآمد لازم و ضروری است. هدف مطالعه حاضر تهیه نانوساختار نیوزومی حاوی ایمنوژن سه‌ظرفیتی (TF، Bp26 و Omp31) بروسلا به‌عنوان کاندیدای نانوواکسن می‌باشد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه پس از طراحی سازه ایمنوژن توسط پایگاه‌ها و نرم‌افزارهای بیوانفورماتیکی، به‌منظور ارزیابی ایمنی‌زایی پروتئین نوترکیب طراحی‌شده، کلون و بیان ژن در Escherichia coli BL21 انجام پذیرفت. پروتئین استخراج‌شده از کشت سلول‌های مذکور توسط ستون Ni-NTA مورد تخلیص قرار گرفت. برای تهیه نیوزوم‌های حامل ایمنوژن سه‌ظرفیتی، روش آبپوشانی لایه نازک به‌کار گرفته شد و با استفاده از آزمون‌های مشخصه‌یابی ‌DLS و Zetasizer مورد ارزیابی قرار گرفت. سپس میزان لود و رهایش ایمنوژن سه‌ظرفیتی محاسبه شد. نتایج: نتایج حاصل از مشخصه‌یابی، ساخت موفق نانوسامانه نیوزومی حاوی ایمنوژن سه‌ظرفیتی را تأیید کرد. نتایج نشان داد که نیوزوم‌های تولیدشده در محدوده مناسبی از اندازه (‌100 نانومتر) قرار دارند. ایمنوژن سه‌ظرفیتی با راندمان بالایی (81/96 درصد) در سامانه، کپسوله شده است. رهایش ایمنوژن سه‌ظرفیتی از نانوسامانه نیوزومی بعد از 96 ساعت 97 درصد گزارش شد؛ علاوه‌براین الگوی رهایش ایمنوژن سه‌ظرفیتی سامانه پوشش‌دهی‌شده، کنترل‌شده‌تر و آهسته‌تر بود که این موضوع تأثیر مثبت نانوسامانه نیوزومی را تأیید می‌کند. نتیجه‌گیری: استفاده از نیوزوم به‌عنوان عامل نانوواکسن نقش مؤثری در کنترل رهایش آنتی‌ژن دارد و می‌تواند به‌عنوان کاندیدای واکسن و افزایش پاسخ ایمنی حفاظتی علیه بروسلا مطرح باشد.